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        金黃色葡萄球菌檢驗

        作者:樂診生物技術發布時間:2020-07-20 18:31:52瀏覽量:0
          金黃色葡萄球菌檢驗
         
          1主題內容與適用范圍
         
          本文規定了食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法。
         
          本文適用于航空食品的檢驗。
         
          2設備和材料
         
          吸管(1ml、10ml)、恒溫培養箱(36±1℃)、冰箱、均質器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等
         
          3培養基和試劑
         
          普通肉湯培養基、胰蛋白胨大豆肉湯、Baird-Prker瓊脂平板、緩沖蛋白胨水(BP)、凝固酶試驗凍干血漿
         
          4檢驗程序(非選擇性增菌法)
         
          金黃色葡萄球菌檢驗程序如下:
         
          檢樣25g+225mlBP胨水
         
          10ml勻液+10ml雙料胰胨肉湯
         
          上述混合液+20ml20%NaCl單料胰胨肉湯
         
          36±1℃2h
         
          B-P平板
         
          36±1℃24h
         
          36±1℃48h
         
          挑可疑菌落,移種到肉湯培養基
         
          36±1℃24h
         
          觀察溶血
         
          涂片染色
         
          凝固酶試驗
         
          報告
         
          5操作步驟
         
          5.1稱取25g固體樣品;吸取25mL液體樣品,加入225mLBP胨水,固體樣品研磨或置均質器中制成混懸液。
         
          5.2吸取10mL上述混懸液,接種于10mL雙料胰蛋白胨大豆肉湯中,置36±1℃培養2h。
         
          5.3再加入20ml含20%NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯,置36±1℃培養24±2h。
         
          5.4劃線轉種2個表面干燥的Baird-Parker瓊脂平板上,36±1℃培養46±2h。
         
          5.5挑取可疑菌落移種到肉湯培養基中,置36±1℃溫箱培養24h。
         
          5.6取肉湯培養物0.3ml同0.5ml凝固酶試驗凍干血漿于8mm*100mm試管內充分混合,置36±1℃培養,定時觀察是否有凝塊形成,至少觀察6h,以內容物完全凝固,使試管倒置或傾斜時不流動為陽性。試驗中需同時做已知陽性和陰性對照。對可疑結果,應進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗。
         
          5.7本菌為革蘭氏陽性球菌,排列是葡萄球狀,無芽胞,無莢膜,致病性葡萄球菌菌體較小,直徑約為0.5~1μm。在Baird-Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2~3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周圍為一混濁帶,在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度,偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落;但無混濁帶及透明圈。
         
          5.8報告結果
         
          如發現有凝固酶試驗陽性的菌落,即報告1g(ml)食品中有金黃色葡萄球菌存在,否則為陰性。
         
          注:本文參照SN0172-92《出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法》
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